Tag Archives: Σωματική μετάλλαξη

MedWire News: Οι ερευνητές έχουν εντοπίσει τον πρωταρχικό στόχο των αυτοαντισωμάτων που βρίσκονται στον ορό των ασθενών με διαταραχή του δέρματος με φουσκάλες pemphigus vulgaris (PV).

Οι ασθενείς με φωτοβολταϊκά κύτταρα αναπτύσσουν αντισώματα κατά των πρωτεϊνών δεσμογλυκίνης (DSG) 1 και 3, τα οποία βοηθούν τα επιδερμικά κύτταρα να κολλήσουν μεταξύ τους και να διατηρήσουν την ακεραιότητα του δέρματος, προκαλώντας οδυνηρές φουσκάλες στο δέρμα και τις μεμβράνες βλέννας.

Ο Giovanna Zambruno (Istituto Dermopatico dell'Immacolata, Ρώμη, Ιταλία) και οι συνάδελφοί του διαπίστωσαν ότι η διεπαφή cis-κόλλα της εξωκυτταρικής περιοχής DSG3 (EC) 1 είναι ο κύριος στόχος του PV αυτοαντισώματος (A) 224 που παράγεται στον ορό ασθενών με PV.

Οι υπάρχουσες θεραπείες για την πάθηση στοχεύουν ολόκληρο το ανοσοποιητικό σύστημα, αλλά αυτό μπορεί να προκαλέσει προβλήματα με ανεπιθύμητες ενέργειες και μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την ευαισθησία των ασθενών στις λοιμώξεις.

Για να προσδιοριστεί πιο συγκεκριμένα η ενεργοποίηση της παραγωγής αυτοαντισώματος στο PV, η Zambruno και η ομάδα απομόνωσαν αντισώματα 15 ανοσοσφαιρίνης (Ig) G ειδικά για DSG3 από δύο ασθενείς με τη διαταραχή.

Από αυτά, τρία διαταραγμένα στρώματα δερματικών κυττάρων στο εργαστήριο και δύο ήταν παθογόνα όταν εκφράστηκαν σε ένα παθητικό μοντέλο παθητικής μεταφοράς.

Τα επιτόπια που αναγνωρίζονται από τα παθογόνα Ρν αντισώματα απομονώθηκαν στους υποτομείς DSG3 EC1 και EC2 και χρησιμοποιήθηκε ένας ειδικός ορολογικός προσδιορισμός για τον εντοπισμό του στόχου του PVA224 ως το cis-συγκολλητικό περιβάλλον στο EC1.

Οι ερευνητές προτείνουν ότι η αυτοαντιδραστικότητα που παρατηρείται στο PV οφείλεται σε σωματικές μεταλλάξεις που παράγονται από ένα αντιγόνο διαφορετικό από το DSG3, καθώς η δέσμευση με το DSG3 εξαφανίστηκε όταν οι σωματικές μεταλλάξεις επανήλθαν στην αλληλουχία της γενετικής γραμμής.

"Η ταυτοποίηση μιας ανοσοκυρίαρχης περιοχής που στοχεύεται από παθογόνα αντισώματα έχει επιπτώσεις στη διάγνωση της ΦΒ και ανοίγει νέες προοπτικές για την καθιέρωση θεραπευτικών προσεγγίσεων για τη θεραπεία των Φ / Β ασθενών", γράφει η Zambruno και η ομάδα στο Journal of Clinical Investigation.

"Τέλος, η γενετική εκδοχή των PV αυτοαντισωμάτων μπορεί να οδηγήσει στην ταυτοποίηση των αντιγόνων που τελικά οδηγούν στην ανάπτυξη αυτής της απειλητικής για τη ζωή ασθένειας".

Το medwireNews (www.medwire-news.md) είναι μια ανεξάρτητη κλινική υπηρεσία ειδήσεων που παρέχεται από την Springer Healthcare Limited. © Springer Healthcare Ltd; 2012

Διαβάστε στη διεύθυνση: http://www.medwire-news.md/66/101414/Dermatology/Therapeutic_targets_for_pemphigus_vulgaris_discovered.html

Το Pemphigus vulgaris (PV) είναι μια αυτοάνοση φλύκταινη ασθένεια του δέρματος και των βλεννογόνων μεμβρανών που προκαλείται από αυτοαντισώματα στις πρωτεΐνες DSG3 και DSG1 της οικογένειας της δεσμογελίνης (DSG), με αποτέλεσμα την απώλεια της προσκόλλησης των κερατινοκυττάρων. Για να μάθετε περισσότερα σχετικά με τα παθογόνα PV αυτοαντισώματα, απομονώσαμε τα αντισώματα 15 IgG ειδικά για το DSG3 από τους ασθενείς με Φ / Β 2. Τρία αντισώματα διέσπασαν τις μονοστρώσεις κερατινοκυττάρων in vitro και το 2 ήταν παθογόνο σε παθητικό μοντέλο μεταφοράς σε νεογνά ποντίκια. Τα επιτόπια που αναγνωρίζονται από τα παθογόνα αντισώματα χαρτογραφήθηκαν στους υπομονάδες DSG3 εξωκυτταρικού 1 (EC1) και EC2, περιοχές που εμπλέκονται σε αλληλεπιδράσεις cis-κόλλας. Χρησιμοποιώντας μια ορολογική δοκιμή ειδικής θέσης, διαπιστώσαμε ότι η διεπαφή cis-συγκολλητικού στην EC1 που αναγνωρίζεται από το παθογόνο αντίσωμα PVA224 είναι ο πρωταρχικός στόχος των αυτοαντισωμάτων που υπάρχουν στον ορό των ΦΒ ασθενών. Τα απομονωθέντα αυτοαντισώματα χρησιμοποίησαν διαφορετικά γονίδια μεταβλητής περιοχής βαριάς και ελαφριάς αλυσίδας και έφεραν υψηλά επίπεδα σωματικών μεταλλάξεων σε συμπληρωματικά καθοριστικές περιοχές, σύμφωνα με την αντιγονική επιλογή. Αξιοσημείωτα, η σύνδεση με το DSG3 χάθηκε όταν οι σωματικές μεταλλάξεις επανήλθαν στην αλληλουχία βλαστικής σειράς. Αυτά τα ευρήματα αναγνωρίζουν την cis-συγκολλητική διασύνδεση του DSG3 ως την ανοσοκυρίαρχη περιοχή που στοχεύεται από παθογόνα αντισώματα σε PV και υποδεικνύουν ότι η αυτοαντιδραστικότητα βασίζεται σε σωματικές μεταλλάξεις που δημιουργούνται στην απόκριση σε ένα αντιγόνο άσχετο με το DSG3.

Το Pemphigus vulgaris (PV) είναι μια απειλητική για τη ζωή ασθένεια που προκαλεί αυτοάνοσες φουσκάλες του δέρματος και των βλεννογόνων μεμβρανών που προκαλούνται από αυτοαντισώματα που δεσμεύονται με τα μόρια προσκόλλησης κυτταρικού κυττάρου τύπου cadherin (DSG3) και DSG3, τα κύρια συστατικά των δεσμοσωμάτων, και προκαλούν απώλεια προσκόλλησης κυττάρων κερατινοκυττάρων. Ο κρίσιμος ρόλος των αυτοαντισωμάτων στην παθογένεση των ΦΒ υποστηρίζεται από τις παρατηρήσεις ότι η δραστηριότητα της νόσου συσχετίζεται με τους τίτλους αντισωμάτων αντι-DSG1, ότι τα νεογνά των μητέρων με δραστικές ΦΒ εκδηλώνουν κυψέλες που προκαλούνται από τη μεταφορά των μητρικών αντισωμάτων στο πλακούντα και ότι οι βλάβες τύπου πέμφιγου που επάγεται σε νεογνικά ποντίκια με παθητική μεταφορά αντι-DSG3 IgG από PV ασθενείς.

Στο δέρμα, το DSG3 εκφράζεται κυρίως στις βασικές και υπερκείμενες στρώσεις, ενώ το DSG1 εκφράζεται κυρίως στις ανώτερες επιδερμικές στιβάδες. Αντίθετα, στα μη κηρωμένα στρωματοποιημένα επιθήλια, όπως ο στοματικός βλεννογόνος, το DSG3 εκφράζεται σε μεγάλο βαθμό σε όλο το επιθήλιο, ενώ το DSG1 εκφράζεται σε πολύ χαμηλότερο επίπεδο. Το μοντέλο διαφορικής έκφρασης των DSG1 και DSG3 είναι υπεύθυνο για τις κλινικές παραλλαγές του πέμφιγου: τα αντισώματα του DSG3 υπάρχουν στη βλεννογόνο μορφή, ενώ τα αντισώματα τόσο για το DSG3 όσο και για το DSG1 σχετίζονται με βλεννογονοδερματικές αλλοιώσεις.

Το DSG3 είναι μια γλυκοπρωτεΐνη που δεσμεύει ασβέστιο με μια εξωκυτταρική περιοχή που περιλαμβάνει διακριτά υποτομέα 5 (EC1-EC5) και συντίθεται ως προπρωτεΐνη, η οποία υποβάλλεται σε επεξεργασία στη συσκευή Golgi με απομάκρυνση προπεπτιδίου πριν μεταφερθεί στην κυτταρική επιφάνεια. Η διάσπαση του προπεπτιδίου λαμβάνει χώρα ανοδικά από ένα συντηρημένο υπόλειμμα τρυπτοφάνης στον υποτομέα EC1, αποκαλύπτοντας υπολείμματα κρίσιμα για το σχηματισμό ομοφυλικών αλληλεπιδράσεων με DSG3 σε αντίθετα κύτταρα. Αρκετές μελέτες έχουν δείξει ότι πολυκλωνικά αντισώματα στον PV ορό αντιδρούν κυρίως με το αμινοτερματικό άκρο του DSG3 στους υποτομείς EC1 και EC2 (αμινοξέα 1-161).

Η απομόνωση των παθογόνων mAbs είναι καθοριστικής σημασίας για την αντιμετώπιση των ερωτήσεων ως προς τον μηχανισμό που προκαλεί την αυτοαντιδραστική απόκριση και οδηγεί στον σχηματισμό κυψελίδων σε ασθενείς με ΦΒ. Amagai και συνεργάτες που απομονώνονται από ένα ενεργό μοντέλο ποντικού PV ένα παθογόνο αντίσωμα AK23, το οποίο προκαλεί απώλεια της κυτταρικής προσκόλλησης συνδέοντας τον υποτομέα EC1 του DSG3 που εμπλέκεται στο σχηματισμό της δια-συγκολλητικής διασύνδεσης. Ένας αριθμός ανθρώπινων αντι-DSG παθογόνων και μη παθογόνων mAbs απομονώθηκαν ως θραύσματα μεταβλητής περιοχής μονής αλυσίδας (scFvs) από έναν Φ / Β ασθενή. Παρομοίως με το mAb AK23, η παθογόνος δραστικότητα αυτών των ανθρώπινων αντισωμάτων χαρτογραφήθηκε στην αμινοτερματική περιοχή του EC1, η οποία καλύπτεται από το προπεπτίδιο. Λαμβανόμενα μαζί, τα δεδομένα για τον άνθρωπο και το ποντίκι υποδεικνύουν ότι τα παθογόνα αντισώματα δεσμεύονται κυρίως με EC1 και διαταράσσουν την προσκόλληση των κερατινοκυττάρων παρεμβαίνοντας με τη δια-συγκολλητική διασύνδεση του DSG3.

Σε αυτή τη μελέτη, απομονώσαμε από ασθενείς με Φ / Β 2 αρκετά IgG αυτοαντισώματα που δεσμεύουν το DSG3. Αυτά τα αντισώματα έφεραν υψηλά επίπεδα σωματικών μεταλλάξεων που απαιτούνταν για σύνδεση με το DSG3. Τα επιτόπια που αναγνωρίζονται από τα παθογόνα αντισώματα 3 χαρτογραφήθηκαν στους υποτομείς EC1 και EC2 σε περιοχές που αναμένεται να εμπλέκονται σε αλληλεπιδράσεις cis-κόλλας. Η περιοχή αυτή βρέθηκε ότι είναι ο πρωταρχικός στόχος των αυτοαντισωμάτων στον ορό σε ασθενείς με ΦΒ. Αυτά τα αποτελέσματα ταυτοποιούν την διεργασία cis-συγκολλητικού ως την ανοσοκυρίαρχη περιοχή που στοχεύεται από παθογόνα αντισώματα σε PV και υποδηλώνουν ότι η αυτοαντιδραστικότητα βασίζεται σε σωματικές μεταλλάξεις που προκαλούνται από μη σχετιζόμενο αντιγόνο.

Πλήρες άρθρο Διαθέσιμο στη διεύθυνση: http://www.jci.org/articles/view/64413